目的 观察骨碎补总黄酮(Gusuibu,GSB)对骨性关节炎(Osteoarthritis,OA)家兔骨髓间充质干细胞(Mesen-chymal mtem cells,MSCs)体外扩增及向软骨细胞分化的影响,深入探讨骨碎补防治OA的作用机理.方法 选用6月龄家兔采用Hulth法建立OA模型.运用全骨髓贴壁法和密度梯度离心法分离培养OA家兔MSCs,通过流式细胞仪对其表面标志测定鉴定MSCs.运用MTT法检测不同浓度的GSB对OA家兔MSCs增殖的影响,以确定最佳促增殖添加剂量.运用流式细胞仪对细胞周期的测定来探讨GSB对OA家兔MSCs增殖周期的影响.将OA家兔MSCs分为空白对照组、经典诱导组、GSB组和经典诱导+GSB组.用免疫组织化学方榆测Ⅱ型胶原的表达,阿利新蓝比色法测定GAG含量来检测OSB对OA家兔MSCs体外成软骨细胞的影响. 结果经MTT法榆测GSB对MSCs增殖作用,发现0.2mMGSB组的OD值较其它组明显提高.流式细胞仪对细胞周期的测定显示0.2mMGSB干预的MSCs细胞周期的比率最高(P<0.05).GSB和成软骨诱导液能增加OA家兔MSCs的活性,Ⅱ型胶原的表达,促进软骨的形成(P<0.05). 结论 GSB能明显促进OA家兔MSCs增殖;促进OA家兔MSCs软骨向分化.
作者:尚平;贺宪;安耀武;江永发;杨俊龙;陈晓陇;潘勇泉;赖震
来源:生物骨科材料与临床研究 2009 年 6卷 6期