以往在研究由促癌物12-o-十四烷酰佛波醇-13-乙酯(12-o-tetradecanoylphorbol-13 -acetate,TPA)诱导的人永生化食管上皮细胞恶性变中基因的差异表达情况时,曾获得中性粒细胞明胶酶相关lipocalin(neutrophil gelatinase-associated lipocalin,NGAL)等新的食管癌癌变相关基因.为深入研究这些癌变相关基因在食管癌中以蛋白质-蛋白质或蛋白质-DNA相互作用为基础的功能网络调控关系,建立了一个食管癌cDNA酵母杂交文库.采用Trizol试剂从一种新的人食管癌细胞(SHEEC,由人永生化食管上皮细胞转化而来)中提取细胞总RNA,采用Oligotex mRNA Kit从细胞总RNA中制备PolyA+ mRNA,采用SuperScriptTM Choice System For cDNA Synthesis Kit合成cDNA,以PolyA+ mRNA为探针,化学发光法监测cDNA合成的质量,以pGADT7为载体构建了SHEEC细胞的cDNA酵母杂交文库.文库的滴度为1.19×109 cfu/ml,重组片段大小主要集中在0.5～6.0 kb,重组率为50
作者：许丽艳；李恩民；牛永东；蔡唯佳；韩溟；吴炳礼；张灿；沈忠英；曾毅
来源：生物化学与生物物理进展 2003 年 30卷 2期
