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Cre/lox P系统由Cre位点特异重组酶和可被Cre特异性识别的lox P位点构成,该系统广泛用于条件性基因敲除和表达,以研究基因功能.为了表达和纯化一种细胞可透过性Cre重组酶(即His6-NLS-Cre-MTS);经IPTG诱导,在BL21(DE3)宿主菌成功表达His6-NLS-Cre-MTS融合蛋白,通过His-Bond Ni-NTA树脂分离并纯化了该蛋白质,随后借助细胞和非细胞的重组系统成功检测了His6-NLS-Cre-MTS的生物活性.细胞可透过性Cre重组酶提供了一种快捷而高效的在细胞和在体水平进行遗传操作的新工具.

作者:郭中敏;徐康;岳颖;黄冰;唐欢;马芸;洪迅;陈系古;肖东

来源:生物化学与生物物理进展 2004 年 31卷 9期

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作者:
郭中敏;徐康;岳颖;黄冰;唐欢;马芸;洪迅;陈系古;肖东
来源:
生物化学与生物物理进展 2004 年 31卷 9期
标签:
Cre/lox P系统,细胞可透过性Cre重组酶,表达,纯化,生物活性检测,细胞和非细胞的重组系统 Cre/lox P system cell-permeable Cre recombinase expression purification biological activity cell-free andintracellular recombination systems
Cre/lox P系统由Cre位点特异重组酶和可被Cre特异性识别的lox P位点构成,该系统广泛用于条件性基因敲除和表达,以研究基因功能.为了表达和纯化一种细胞可透过性Cre重组酶(即His6-NLS-Cre-MTS);经IPTG诱导,在BL21(DE3)宿主菌成功表达His6-NLS-Cre-MTS融合蛋白,通过His-Bond Ni-NTA树脂分离并纯化了该蛋白质,随后借助细胞和非细胞的重组系统成功检测了His6-NLS-Cre-MTS的生物活性.细胞可透过性Cre重组酶提供了一种快捷而高效的在细胞和在体水平进行遗传操作的新工具.