为筛选支气管上皮鳞状不典型增生进展的分子标志物,采用改良的脱氧胆酸-三氯醋酸(deoxycholatetrichloroaetic acid,DOC-TCA)法提纯支气管上皮总蛋白质进行双向电泳(two-dimensional electrophoresis,2-DE),应用ImageMaster 2D分析软件、Student'st-检验识别差异蛋白质点,基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(matrix-assisted laser desorption/ionization time-of-flight mass spectrometry,MALDI-TOF-MS)得到相应的肽质指纹图(peptide mass fingerprint,PMF),搜索数据库鉴定差异蛋白质.由此获得人支气管上皮不典型增生和浸润癌组织的2-DE图谱及其凝胶的平均蛋白质点数(1 273.00+43.31,1326.00±66.63),且两阶段间平均差异蛋白质点数为56.00±8.96.取38个差异蛋白质点进行PMF分析,鉴定出一些与细胞生长、分化或肿瘤发生等有关的蛋白质,随即应用免疫组化检测差异蛋白质EGFR、c-Jun、Mdm2在两类组织中的表达,其结果也显示了类似的表达差异.支气管上皮不典型增生恶性转化过程中存在蛋白质的差异表达,这些差异蛋白质可能以不同的方式参与了癌变过程,且EGFR、c-Jun、Mdm2的免疫组化验证结果与质谱结果的一致性表明,比较蛋白质组学是一种筛选癌变相关分子标志物的可靠方法之一.

作者：吴晓英；陈主初；肖志强；李萃；汪春年；李建玲；冯雪萍；张鹏飞

来源：生物化学与生物物理进展 2004 年 31卷 11期