具有特异结合甘露糖基的雪花莲外源凝集素(Galanthus Nivalis agglutinin,GNA)具有多种生物活性,在糖蛋白分离、逆转录病毒病和害虫防治等方面有广泛的应用价值.该试验分别采用超声破碎法、冻融裂解法和溶菌酶法破碎重组大肠杆菌细胞后,经尿素或SKL(十二烷基肌氨酸钠水溶液)溶解后,再透析复性获得了在大肠杆菌(E.coli)中高效表达的重组GNA蛋白,并经SDS-PAGE电泳检测GNA的大小、浓度及表达量.通过对诱导表达时间、超声处理的功率、时间、模式、尿素和SKL洗涤浓度,透析条件的优化组合,建立了一套从大肠杆菌细胞中分离重组GNA蛋白的有效方法,为进一步的重组GNA生物活性试验提供了物质基础.
作者:罗素兰;长孙东亭
来源:生物技术 2004 年 14卷 2期