目的:克隆人ERP57蛋白进行原核表达和纯化.方法:采用巢式RT-PCR从人非小细胞肺腺癌A549细胞总RNA中克隆人ERP57 cDNA,构建ERP57原核表达质粒(pET-28a/ERP57)并转化E.coli的BL21菌株.IPTG诱导蛋白表达,并在变性条件下经Ni-NTA树脂亲和层析纯化.分别用SDS-PAGE和Western blotting鉴定.结果:成功获得大小为1518bp的人ERP57基因片段,转化菌诱导性表达61kDa的人ERP7蛋白,该蛋白可经Ni-NTA树脂亲和层析高度纯化.结论:成功获得纯化的重组人ERP57蛋白,为后续ERP57蛋白功能研究奠定了基础.
作者：杨建林；韩钰；王艳林；张伟
来源：生物技术 2010 年 20卷 3期
