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提取高质量的RNA是从基因表达水平上研究油菜种子和种皮发育的必要条件.现有方法因为油菜种子脂肪、多酚和多糖,难以快速获得完整、高纯度的油菜种子总RNA.本试验针对油菜种子和种皮特点,利用苯酚-氯仿抽提后用无水乙醇沉淀RNA,建立了在油菜种子和种皮中快速提取高质量总RNA的提取方法,电泳分析表明28S rRNA亮度约为18S rRNA的2倍;紫外分光光度计检测A260/A280介于1.8~2.0之间.用该法分离的RNA,已成功用于RT-PCR、Northern blot分析和基因全长的克隆等分子生物学研究.

作者:严明理;刘忠松;官春云;陈社员;刘显军

来源:生物技术通报 2007 年 6期

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作者:
严明理;刘忠松;官春云;陈社员;刘显军
来源:
生物技术通报 2007 年 6期
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RNA提取 油菜 种子 油菜种皮
提取高质量的RNA是从基因表达水平上研究油菜种子和种皮发育的必要条件.现有方法因为油菜种子脂肪、多酚和多糖,难以快速获得完整、高纯度的油菜种子总RNA.本试验针对油菜种子和种皮特点,利用苯酚-氯仿抽提后用无水乙醇沉淀RNA,建立了在油菜种子和种皮中快速提取高质量总RNA的提取方法,电泳分析表明28S rRNA亮度约为18S rRNA的2倍;紫外分光光度计检测A260/A280介于1.8~2.0之间.用该法分离的RNA,已成功用于RT-PCR、Northern blot分析和基因全长的克隆等分子生物学研究.