对甲醇诱导重组Pichia pastoris GS115 mut+高效表达黑曲霉葡萄糖氧化酶基因的条件进行了研究,拟建立一条高效低成本的生产重组葡萄糖氧化酶的工艺路线.通过摇瓶试验对发酵培养基、诱导时机、pH、诱导温度、甲醇诱导浓度等进行了优化,随后进行了50L发酵罐扩大化培养.结果表明,最适发酵培养基为YEPD培养基,甲醇诱导产酶的最佳时机为菌体对数生长末期,最佳诱导浓度为1％,最适诱导pH范围为6-6.5,最适诱导温度25℃.按优化的条件用50 L发酵罐分批培养酵母14 h,甲醇诱导培养48 h后生物量和酶活性达到最高.菌体终密度达到OD600为44,每升发酵液中产酶105 kU,发酵液上清蛋白含量为1 000 mg/L.
作者：王帅坤；郝杰清；王振伟；师慧；孟延发
来源：生物技术通报 2013 年 9期
