克隆兰州大尾羊促分裂素原活化蛋白激酶MAPK13基因，并分析其序列及其编码蛋白的生物学特性，为研究绵羊MAPK13基因的功能和生产应用提供参考。根据绵羊MAPK13基因CDS序列设计特异引物，利用RACE和RT-PCR技术克隆获得兰州大尾羊MAPK13基因全长序列，并结合生物信息学方法分析其生物学特性。克隆获得兰州大尾羊MAPK13基因cDNA序列全长1397 bp，其CDS区片段长1102 bp，编码367个氨基酸。预测兰州大尾羊MAPK13蛋白分子量为42.29 kD，理论等电点为8.82，为非跨膜的疏水性蛋白，亚细胞定位主要在细胞质中，无信号肽，不属于分泌蛋白。预测其氨基酸序列有19个磷酸化位点，3个糖基化位点，3个磷酸化功能结构域，4个其他结构域，1个LCR片段，二级结构以α-螺旋为主。同源性分析显示兰州大尾羊MAPK13基因序列与已发布的绵羊MAPK13 mRNA序列（登录号：NM_001139455.1）相比，其第852位发生碱基转换（CA），导致编码蛋白第265位氨基酸发生碱基转换（ST），同时，第951位发生碱基转换（TG），但其所编码氨基酸不变。构建的基因进化树分析结果显示兰州大尾羊与牛亲缘关系最近。兰州大尾羊与其他物种MAPK13基因在结构上相似性较高，说明该基因具有高度的保守性，其序列包含的S_TKc结构域可将ATP的γ磷酰基转移到
作者：金方园；徐红伟；达小强；臧荣鑫；柏家林；曹忻；蔡勇；冯玉兰；杨具田
来源：生物技术通报 2014 年 8期
