蛋白内肽酶AspN是一种锌金属内切肽酶，能选择性切割天冬氨酸的N端肽键，广泛应用于蛋白的多肽制备及质量肽图谱鉴定。目前内肽酶AspN来源于细菌分泌，产量低，制备困难，成本高，极大地限制了该酶的应用。将脑膜脓毒性黄杆菌分泌的蛋白内肽酶AspN所对应的基因克隆入表达载体pET32a，导入E.coli BL21（DE3），首次运用原核表达系统进行可溶性融合表达，亲和层析对重组蛋白进行纯化。用HPLC、SDS-PAGE和荧光底物Anthranilyl-Ala-Phe-Ala-Phe-Asp-Val-Phe（NO2）-Tyr-Asp对重组酶进行酶活鉴定。结果表明重组的内肽酶AspN具有与标准品基本一致的酶切活性，能够较好地应用于生物和制药领域。
作者：郑娟；郭怀祖；李晶；段树燕；赵自叶；张大鹏；郭尚敬；王皓
来源：生物技术通报 2015 年 1期
