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犬α干扰素(CaIFNα)在犬病防治过程中应用广泛。旨在开发一种高效的CaIFNα表达方法。首先按家蚕密码子的偏好性对GenBank中的一个CaIFNα基因进行了优化与合成,将其克隆到杆状病毒转移载体pVL1393中,并与亲本病毒BmBacmid共转染家蚕细胞进行细胞内重组。得到的重组病毒用于感染家蚕幼虫,收集发病幼虫的蚕血淋巴用于CaIFNα检测。采用细胞病变抑制法在MDCK-VSV*GFP系统中测定其抗病毒活性。结果显示家蚕表达的CaIFNα能有效抑制VSV*GFP在细胞内的复制,其抗病毒活性不低于1.78×106U/mL。

作者:李皓洋;胡小元;易咏竹;杨鑫;张志芳;李轶女

来源:生物技术通报 2015 年 6期

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李皓洋;胡小元;易咏竹;杨鑫;张志芳;李轶女
来源:
生物技术通报 2015 年 6期
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犬α干扰素 家蚕杆状病毒表达系统 抗病毒活性检测 canine interferon alpha silkworm-baculovirus expression system antiviral activity assay
犬α干扰素(CaIFNα)在犬病防治过程中应用广泛。旨在开发一种高效的CaIFNα表达方法。首先按家蚕密码子的偏好性对GenBank中的一个CaIFNα基因进行了优化与合成,将其克隆到杆状病毒转移载体pVL1393中,并与亲本病毒BmBacmid共转染家蚕细胞进行细胞内重组。得到的重组病毒用于感染家蚕幼虫,收集发病幼虫的蚕血淋巴用于CaIFNα检测。采用细胞病变抑制法在MDCK-VSV*GFP系统中测定其抗病毒活性。结果显示家蚕表达的CaIFNα能有效抑制VSV*GFP在细胞内的复制,其抗病毒活性不低于1.78×106U/mL。