旨在优化拟穴青蟹抗菌肽hyastatin基因原核表达条件.克隆拟穴青蟹抗菌肽hyastatin基因成熟肽片段,与pET-28a表达载体连接后,转入到大肠杆菌BL21(DE3)中,通过优化条件进行诱导表达.结果显示,在异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)浓度0.2 mmol/L、37℃条件下培养4 h后表达量最大,分子大小与预期值相符.融合蛋白主要以包涵体形式高效表达,通过HisTrap HP柱子使其得到进一步纯化.Western blot分析表明,该融合蛋白可与鼠抗His-tag单克隆抗体发生特异性结合.说明通过优化表达条件,获得拟穴青蟹抗菌肽hyastatin基因原核表达表达产物.
作者：彭银辉；蔡小辉；熊向英；刘旭佳；黄国强
来源：生物技术通报 2015 年 31卷 7期
