以黄鳝F64基因序列为模板设计引物，扩增用于cRNA探针合成的模板，构建F64/pGM-T重组质粒并线性化，利用RNA聚合酶体外转录合成正、反义cRNA探针，并对其进行地高辛标记，利用原位杂交方法检测F64基因在黄鳝性腺发育过程中的表达变化情况。结果显示，正义探针未检测到阳性信号，反义探针检测到该基因在黄鳝性腺发育早期不表达，于V期性腺开始表达。研究结果表明，体外转录法可以有效合成cRNA探针，制备的cRNA探针可以准确检测F64基因的时空表达。
作者：蒋骄云；田文斐；冯龙；曲宪成
来源：生物技术通报 2016 年 32卷 3期
