旨在体内证明蓝藻橙色类胡萝卜素蛋白(OCP)具备不依赖类胡萝卜素的单线态氧(1O2)清除功能。通过 PCR 扩增蓝藻 OCP 基因,对其进行原核诱导表达,并通过细菌点板和生长曲线测定法检验它在大肠杆菌中的抗1O2活性。结果表明,直接从蓝藻水体提取的宏基因组中成功扩增得到 OCP 基因 SyOCP,其编码区大小为954 bp。生物信息学分析表明,SyOCP 来源于主要蓝藻种类——集胞藻(Synechocystis sp. PCC 6803)。经 IPTG 诱导,SyOCP 基因在大肠杆菌中获得了高水平的可溶性表达。另外,异源表达 SyOCP 的重组大肠杆菌对常见的1O2光敏诱发剂染料——亚甲基蓝的耐受性得到了显著增强。蓝藻 OCP(不结合类胡萝卜素)内在的抗1O2功能在大肠杆菌中得到了体内验证。
作者:刘畅;罗著;张梦如;杨玉梅;刘娴;龚明;邹竹荣
来源:生物技术通报 2016 年 32卷 7期