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猪类嗜乳脂蛋白5(Btnl5)属于嗜乳脂蛋白家族,其同源蛋白多为免疫调节蛋白,为探索Btnl5的序列特征及其功能,利用反转录PCR(RT-PCR)和cDNA末端快速扩增(RACE)技术对Btnl5基因cDNA全长进行克隆及序列分析,采用定量PCR技术检测Btnl5在猪不同组织中的表达丰度,利用报告基因法检测Btnl5对NF-kB信号通路的影响.克隆得到Btnl5基因cDNA全长共3334 bp,包含1680 bp的开放读码框,可编码长度为559个氨基酸残基的多肽链.蛋白结构预测表明Btnl5编码的蛋白含有信号肽、两段免疫球蛋白结构域、跨膜结构域和B30.2结构域.定量PCR分析表明,在检测的11个组织中,Btnl5只在空肠中具有较高水平的表达.报告基因检测结果显示Btnl5对NF-kB信号通路有一定的抑制作用.研究结果说明,Btnl5可能通过抑制NF-kB信号通路参与调节肠道免疫.

作者:包琦;赵凯;段子渊

来源:生物技术通报 2017 年 33卷 6期

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包琦;赵凯;段子渊
来源:
生物技术通报 2017 年 33卷 6期
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猪 类嗜乳脂蛋白5 表达分析 报告基因检测 核因子kB porcine butyrophilin-like 5 expression analysis reporter gene assay nuclear factor kB
猪类嗜乳脂蛋白5(Btnl5)属于嗜乳脂蛋白家族,其同源蛋白多为免疫调节蛋白,为探索Btnl5的序列特征及其功能,利用反转录PCR(RT-PCR)和cDNA末端快速扩增(RACE)技术对Btnl5基因cDNA全长进行克隆及序列分析,采用定量PCR技术检测Btnl5在猪不同组织中的表达丰度,利用报告基因法检测Btnl5对NF-kB信号通路的影响.克隆得到Btnl5基因cDNA全长共3334 bp,包含1680 bp的开放读码框,可编码长度为559个氨基酸残基的多肽链.蛋白结构预测表明Btnl5编码的蛋白含有信号肽、两段免疫球蛋白结构域、跨膜结构域和B30.2结构域.定量PCR分析表明,在检测的11个组织中,Btnl5只在空肠中具有较高水平的表达.报告基因检测结果显示Btnl5对NF-kB信号通路有一定的抑制作用.研究结果说明,Btnl5可能通过抑制NF-kB信号通路参与调节肠道免疫.