旨在获得具有免疫活性的SARS-CoV-2S1蛋白,为COVID-19的免疫预防及临床诊断提供较好的候选抗原.该研究利用PCR技术扩增出刺突蛋白(Spike,S)的S1亚基序列,通过同源重组法将目的片段克隆至冷休克表达载体pCold I,转化至大肠杆菌BL21感受态细胞内诱导表达S1蛋白,经Ni2+柱亲和层析纯化后,通过SDS-PAGE和Western blotting鉴定目的蛋白的表达情况.结果表明,已成功表达含His标签的S1蛋白,并且已获得浓度和纯度较高、能与S1多克隆抗体反应的目的蛋白.此外,蛋白刺激细胞的结果表明,原核表达的S1蛋白免疫原性良好,能诱导小鼠巨噬细胞上调表达多种细胞因子和趋化因子,促进RAW264.7细胞产生免疫反应.综上,该研究成功构建了 pColdI-S1重组质粒,获得了 SARS-CoV-2的良好候选抗原S1蛋白.
作者：汪巧菊；胡雨萌；温亚亚；宋丽；孟闯；潘志明；焦新安
来源：生物技术通报 2022 年 38卷 3期
