目的:转铁蛋白受体特异性富含于血脑屏障和肿瘤细胞的表面,是当前中枢神经系统疾病和肿瘤治疗中定向转运的重要靶标.拟获得在大肠杆菌中能高效可溶表达的转铁蛋白受体单链抗体与链亲和素(SA)的重组融合蛋白.方法:根据GenBank数据库报道的SA的核苷酸序列分段合成基因,连接后经PCR获得完整的基因片段,插入pGEM-T载体中测序.将序列正确的SA基因与大鼠转铁蛋白受体单链抗体基因ox26-scFv分别插入原核表达载体pTIG-Trx中,构建重组表达克隆pTIG-Trx/scFv-SA,并在大肠杆菌中诱导表达.ELISA检测融合蛋白的生物学活性.结果:对pGEM-T/SA克隆的测序结果显示,合成的SA基因与文献报道相符.重组融合蛋白在大肠杆菌中获得了可溶性表达,约占菌体上清总蛋白量的30
作者:颜冰;赵莉霞;黄培堂
来源:生物技术通讯 2006 年 17卷 5期