目的:表达并纯化出具有生物学活性的重组猪α-干扰素.方法:根据前期合成的猪α-干扰素基因序列设计引物,用PCR方法扩增出猪α-干扰素基因,并将其定向克隆入原核表达载体pET28中,酶切及测序鉴定正确后,转化大肠杆菌BL21进行诱导表达,对表达产物通过镍琼脂糖凝胶柱亲和层析纯化、透析法复性后,采用微量细胞病变抑制法测定重组猪α-干扰素的活性.结果:测序结果表明构建了猪α-干扰素原核表达载体pET28-polFN-α;诱导表达后经SDS-PAGE分析,在相对分子质量约21×103的位置出现明显的诱导蛋白条带,与目的蛋白大小相近;经分析表达产物主要以包涵体形式存在,约占菌体总蛋白的36
作者：贾自文；吕茂民；冯晶晶；赵媛媛；王卓；章金刚
来源：生物技术通讯 2009 年 20卷 3期
