目的:构建人IA-2基因不同区段原核表达载体,诱导表达获得重组蛋白,并初步验证其在1型糖尿病蛋白酪氨酸磷酸酶自身抗体检测中的价值.方法:用RT-PCR方法调取目的基因,构建相应的原核表达质粒,转化大肠杆菌HB101,诱导表达获得纯化重组蛋白;以重组蛋白为包被抗原,初步建立检测蛋白酪氨酸磷酸酶自身抗体的ELISA方法,评价各片段在1型糖尿病诊断中的价值.结果:获得了2种可被1型糖尿病患者血清识别的重组人蛋白酪氨酸磷酸酶抗原区段IA-2(601~979)和IA-2(683~979),检测敏感性和特异性相当,但IA-2(683~979)检测的阳性D450mm值明显高于IA-2(601~979),成为首选的抗原区段.结论:所选重组人IA-2(683~979)抗原区段具有良好的抗原性,可作为1型糖尿病患者辅助诊断试剂的候选抗原.
作者:王国华;张贺秋;宋晓国;陈坤;朱翠侠;楚晓燕;刘喜明;戴振华;方平;冯晓燕
来源:生物技术通讯 2010 年 21卷 1期