KPC-2型碳青霉烯酶的表达纯化及其催化抗生素水解的动力学-临床诊疗知识库

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作者：

刘雄；张凤娇；李享；陈芳红；房华丽；王琴；李涛；王慧

来源：

生物技术通讯 2013 年 5期

标签：

细菌耐药 KPC-2型碳青霉烯酶 β内酰胺类抗生素酶催化动力学 antibiotic resistance Klebsiella pneumoniae carbapenemase-2 β-lactamase enzyme kinetics

目的：：表达纯化KPC-2型碳青霉烯酶，并研究其催化抗生素水解的酶动力学活性。方法：将KPC-2基因与pET-22b（+）原核表达载体连接后转化大肠杆菌BL21（DE3），IPTG诱导表达，表达产物经FF镍柱纯化后，SDS-PAGE检测蛋白的纯度；用BioTek酶联仪进一步检测其抗生素水解范围及动力学特性。结果：构建了高效表达KPC-2的工程菌，得到了纯度在90

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