目的:对获得的3株肠道病毒71(EV71)型毒株进行全基因组序列测定,并对其进化特点及分型进行初步分析。方法:提取病毒RNA,反转录得到cDNA,PCR分段扩增覆盖病毒全长序列的6个重叠片段(不包括多聚腺苷酸尾);用软件将3株EV71的各片段序列进行拼接、编辑和校正,随后进行氨基酸翻译及序列比较;用MEGA4.1软件构建系统进化树。结果:获得了3株EV71的全长序列:GDV103株基因组全长7404 nt,包括741 bp的5'端非编码区(UTR)、6582 bp的病毒基因组编码区(ORF)及81 bp的3'UTR;安徽株(Anhui2007)基因组全长7405 nt,包括742 bp的5'UTR、6582 bp的ORF及81 bp的3'UTR;VR1432株基因组全长7408 nt,包括743 bp的5'UTR、6582 bp的ORF及83 bp的3'UTR长。经同源性比对和进化树分析,证实GDV103和安徽株EV71属于C基因型的C4基因亚型,而VR1432株则属于C基因型的C2基因亚型。结论:获得了3株EV71的全长基因组序列,并进一步探讨了其型别,为下一步的干扰素保护实验奠定了基础。
作者:刘颖;樊红艳;赵兴卉;张晓鹏;于蕊;吴诗坡;张哲;付玲;侯利华
来源:生物技术通讯 2013 年 6期