目的:采用多种方法探究FoxM1/mdr1信号调控的结合肽P201与5-氟尿嘧啶(5FU)联合用药对肝癌细胞HepG2的协同杀伤作用及抗耐药分子机制.方法:CCK-8法测定联合用药对HepG2细胞的抑制杀伤作用;吖啶橙/溴化乙锭(AO-EB)荧光双染、AnnexinⅤ-FITC/PI流式细胞术检测细胞凋亡;细胞划痕和Transwell细胞迁移实验检测HepG2细胞迁移能力;最后通过qRT-PCR和Western印迹检测HepG2细胞中FoxM1、mdr1和ABCG2等耐药相关基因在mRNA水平和蛋白水平的表达量.结果:联合用药[P201(45.0μg/mL)+5FU(100.0μg/mL)]作用48 h抑制率达83.8％,作用24 h的抑制率为77.8％,显著高于单独用药(P<0.001);流式细胞术检测联合用药细胞凋亡率达43.4％,而单独用药分别为19.4％、25.1％;联合用药在mRNA水平可显著下调HepG2细胞中的FoxM1、mdr1耐药基因,与蛋白水平结果一致;联合用药可显著抑制HepG2细胞的迁移.结论:联合用药对HepG2细胞有强的抑制杀伤作用,在促进细胞凋亡的同时可显著抑制HepG2细胞迁移,且通过下调FoxM1、mdr1和ABCG2等耐药基因和蛋白的表达,增加HepG2细胞对5FU的敏感性.提示P201可提升肿瘤细胞对化疗药物的敏感性,减少抗癌药物的副作用.
作者：郭红萍；敖智广；王隽；王思怡；付鹏德；刘新荣；茆灿泉
来源：生物技术通讯 2019 年 30卷 3期
