目的:制备高活性新型冠状病毒N蛋白的优势表位区段抗原,并初步评价该抗原在新型冠状病毒肺炎诊断中的应用价值.方法:利用生物学软件分析N蛋白的B细胞表位分布,选取含有优势表位的抗原区段,然后用分子生物学技术进行克隆表达获得纯化抗原,ELISA初步评价该优势表位区段抗原的检测性能.结果:经过分析筛选确定15~215 aa为优势表位抗原区段,并获得了高效表达抗原.经过Biocore结合实验,确定优势表位区段抗原NP15-215可以与新型冠状病毒肺炎患者血清样本发生特异性抗原抗体反应.基于该抗原建立的IgM和IgG间接ELISA方法,对临床样本的检测灵敏度分别为60.87%、95.65%,特异性分别为90%、100%.NP-IgM检测的AUC值为0.797,NP-IgG检测的AUC值为0.998.结论:优势表位区段抗原NP15-215可用于NP抗体检测,利用该抗原建立的NP-IgM/IgG间接ELISA检测方法可以很好地区分新型冠状病毒肺炎患者和健康者.
作者:王坤;张玲;王超男;陈远哲;范占科;李垚;刘念;冯晓燕;付强;张贺秋
来源:生物技术通讯 2020 年 31卷 6期