谷胱甘肽-S-转移酶(GST)是生物体内重要的解毒酶系之一.根据斜纹夜蛾(Spodotera litura)GST基因设计特异引物,从cDNA文库中扩增GST基因并克隆至pGEM-T栽体,经鉴定后经Spe I和EcoR I双酶切后,与表达载体pPROEX HTb连接.转化感受态细胞E.coli DH5a,经PCR鉴定和双酶切鉴定得到阳性重组质粒pPROEX HTbGST,在IPTG诱导下,获得融合蛋白的表达.经SDS-PAGE蛋白电泳鉴定,表达产物为25KD的GST融合蛋白.Northern杂交结果表明,2龄期斜纹夜蛾GST基因在mRNA水平上的表达量最大,3龄期次之,5龄期时的表达量最小.
作者：王皓翔
来源：生物学杂志 2011 年 28卷 2期
