目的 寻找人骨髓间充质干细胞(hBMSC)扩增并向肝细胞方向诱导分化的培养体系,并验证该体系的诱导效率.方法 健康成人志愿者骨髓,经密度梯度离心分离人骨髓单个核细胞(hBMMNC),采用含表皮生长因子(EGF)和血小板衍生生长因子-BB(PDGF-BB)的培养液进行扩增培养至1010数量级后,以含肝细胞生长因子(HGF)、碱性成纤维样细胞生长因子4(FGF-4)、制瘤素(OSM)质量浓度各20 ng/mL的培养液进行诱导培养,以RT-PCR、酶联免疫吸附分析(ELISA)、流式细胞分析、生物化学检测等方法检测其白蛋白、CK18、甲胎蛋白、尿素等的合成能力及氨代谢能力.结果 培养液扩增hBMSC至1010数量级平均需(22.1 ± 2.2) d,扩增后细胞表型特征仍符合hBMSC特征.扩增后的细胞经上述诱导体系诱导后,6 d出现甲胎蛋白的合成,9 ～ 12 d出现白蛋白的合成,18 d达到高峰;对氨的代谢和尿素的合成功能在9 ～ 12 d出现并持续存在.结论 以含EGF和PDGF-BB的培养液扩增hBMSC快速,并能很好地保持干细胞的表型特征和诱导潜能.以含HGF、FGF-4、OSM质量浓度各20 ng/mL的诱导培养体系,能成功地诱导经扩增后的hBMSC向肝细胞方向转化.
作者：朱章华；仇毓东；施晓雷；谢婷；丁义涛
来源：生物医学工程与临床 2010 年 14卷 3期
