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目的 观察蛋白激酶A(PKA)信号通路对培养的肝细胞环腺苷酸(cAMP)反应元件结合蛋白(CREB)磷酸化及过氧化物酶增殖激活受体协同激活因子α(PGC-1α)表达的调控作用.方法 利用PKA抑制剂H89和cAMP激动剂Forskolin 预处理原代培养的大鼠肝脏细胞,以Westernblot和逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法 测定不同处理组CREB/P-CREB蛋白及PGC-1αmRNA的表达变化.结果 以Forskolin作用的肝细胞,与对照组相比,CREB蛋白的磷酸化和PGC-1仅mRNA的表达水平明显增高;预先加入PKA抑制剂H89,再加入Forskolin作用细胞,则CREB蛋白磷酸化和PGC-1α mRNA表达受到明显抑制(P<0.01),差异有统计学意义.结论 PKA信号通路参与调控肝细胞CREB的磷酸化和PGC-1α的表达,可能与糖代谢的调节有关.

作者:王晶;许智博;田慧;李艳波;刘晓民

来源:生物医学工程与临床 2011 年 15卷 3期

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王晶;许智博;田慧;李艳波;刘晓民
来源:
生物医学工程与临床 2011 年 15卷 3期
标签:
cAMP反应元件结合蛋白 过氧化物酶体增殖受体协同激活因子α 蛋白激酶A 信号转导通路 糖尿病
目的 观察蛋白激酶A(PKA)信号通路对培养的肝细胞环腺苷酸(cAMP)反应元件结合蛋白(CREB)磷酸化及过氧化物酶增殖激活受体协同激活因子α(PGC-1α)表达的调控作用.方法 利用PKA抑制剂H89和cAMP激动剂Forskolin 预处理原代培养的大鼠肝脏细胞,以Westernblot和逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法 测定不同处理组CREB/P-CREB蛋白及PGC-1αmRNA的表达变化.结果 以Forskolin作用的肝细胞,与对照组相比,CREB蛋白的磷酸化和PGC-1仅mRNA的表达水平明显增高;预先加入PKA抑制剂H89,再加入Forskolin作用细胞,则CREB蛋白磷酸化和PGC-1α mRNA表达受到明显抑制(P<0.01),差异有统计学意义.结论 PKA信号通路参与调控肝细胞CREB的磷酸化和PGC-1α的表达,可能与糖代谢的调节有关.