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目的:观察乙醇所致原代培养小鼠肝细胞损伤中脂肪酸合酶( FASN)的表达情况,探讨表皮生长因子受体( EGFR)在此过程中可能的作用。方法常规原代培养小鼠肝细胞,随机分为对照组(生理盐水组)、乙醇组、Gefitinib组及Gefitinib加乙醇组,收集并测定细胞裂解液中丙氨酸氨基转移酶( ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶( AST)活性和丙二醛( MDA)浓度;提取细胞总RNA及蛋白质,分别采用real time-PCR及Western blot方法检测FASN、固醇调节元件结合蛋白( sterol regulatory ele-ment binding proteins,SREBP-1c)及p-EGFR的基因及蛋白的表达。结果经150 mmol/L乙醇作用10 h的小鼠原代培养肝细胞贴壁生长状况变差,与对照组比较,细胞裂解液中ALT、AST活性及MDA浓度显著上升(P<0.01),出现肝细胞损伤。与对照组比较,Gefitinib组肝细胞的FASN、SREBP-1c及EGFR在基因及蛋白水平均无明显变化(P>0.05),乙醇组肝细胞的FASN、SREBP-1c及p-EGFR在基因及蛋白水平表达丰度均明显升高,其差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。与乙醇组比较,Gefitinib加乙醇组肝细胞中FASN及SREBP-1c的基因及蛋白表达水平显著降低(P<0.01),其p-EGFR mRNA的表达量仍处于高值,但差异无统计学意义(P>0.05),而其蛋白表达水平出现显著下降(P<0.05)。结论 FASN在正常

作者:赵刚;董蕾;李红;史海涛;秦斌;赵红莉;鲁晓岚

来源:山西医科大学学报 2016 年 47卷 8期

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作者:
赵刚;董蕾;李红;史海涛;秦斌;赵红莉;鲁晓岚
来源:
山西医科大学学报 2016 年 47卷 8期
标签:
表皮生长因子受体 酒精性肝损害 脂肪酸合酶 酪氨酸激酶抑制剂 epidermal growth factor receptor ethanol-induced liver injury fatty acid synthase tyrosine kinase inhibitor
目的:观察乙醇所致原代培养小鼠肝细胞损伤中脂肪酸合酶( FASN)的表达情况,探讨表皮生长因子受体( EGFR)在此过程中可能的作用。方法常规原代培养小鼠肝细胞,随机分为对照组(生理盐水组)、乙醇组、Gefitinib组及Gefitinib加乙醇组,收集并测定细胞裂解液中丙氨酸氨基转移酶( ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶( AST)活性和丙二醛( MDA)浓度;提取细胞总RNA及蛋白质,分别采用real time-PCR及Western blot方法检测FASN、固醇调节元件结合蛋白( sterol regulatory ele-ment binding proteins,SREBP-1c)及p-EGFR的基因及蛋白的表达。结果经150 mmol/L乙醇作用10 h的小鼠原代培养肝细胞贴壁生长状况变差,与对照组比较,细胞裂解液中ALT、AST活性及MDA浓度显著上升(P<0.01),出现肝细胞损伤。与对照组比较,Gefitinib组肝细胞的FASN、SREBP-1c及EGFR在基因及蛋白水平均无明显变化(P>0.05),乙醇组肝细胞的FASN、SREBP-1c及p-EGFR在基因及蛋白水平表达丰度均明显升高,其差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。与乙醇组比较,Gefitinib加乙醇组肝细胞中FASN及SREBP-1c的基因及蛋白表达水平显著降低(P<0.01),其p-EGFR mRNA的表达量仍处于高值,但差异无统计学意义(P>0.05),而其蛋白表达水平出现显著下降(P<0.05)。结论 FASN在正常