目的 研究同型半胱氨酸(homocysteine,Hcy)对casepase途径介导的内皮细胞凋亡和焦亡的促进作用,以及该过程中芥子酸(sinapic acid,SA)对Hcy的拮抗作用. 方法 分别利用0,0.1,0.3,0.5,1,3,5 mmol/L浓度的Hcy处理HUVEC-12人脐静脉内皮细胞24h,检测细胞凋亡和细胞焦亡水平,筛选最适处理浓度;以最适浓度Hcy处理细胞24h,同时分别添加0.1,0.5,1,5,10 μmol/L的SA.采用Annexin-Ⅴ/PI法检测早期细胞凋亡,caspase-1 FLICA/PI法检测细胞的焦亡,Westernblot检测细胞中焦亡关键调控蛋白NRLP3、ASC、caspase-1,凋亡相关蛋白caspase-8、caspase-3和抗凋亡蛋白Bcl-2的表达,通过ELISA方法检测细胞上清中内皮素(endothelin-1,ET-1)及炎性因子白细胞介素1β(interleukin-1β,IL-1β)的分泌量. 结果细胞凋亡细胞焦亡水平随Hcy浓度升高而逐渐上升;与对照相比,当Hcy浓度分别≥0.5 mmol/L和≥1 mmol/L时,细胞凋亡和焦亡水平显著升高(P＜0.05);3 mmol/L和5 mmol/L Hcy进一步促进细胞的凋亡、焦亡及相关调控蛋白的水平(P＜0.05);选择3 mmol/L为最适浓度,用于后续研究.1μmol/L SA可以抑制上述改变并能拮抗Hcy诱导的ET-1和IL-1β的分泌(P＜0.05),并且其拮抗作用跟泛caspase抑制剂Z-VAD-FMK的效果类似. 结论Hcy可通过casepases途径诱

作者：裴星；韩勇；丘红；樊一钢；耿杰；田红燕

来源：山西医科大学学报 2017 年 48卷 11期