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目的 制备一种基于免疫荧光技术的微流控芯片,用于降钙素原(PCT)的高灵敏度定量检测,评价其临床应用价值.方法 按照检测需求绘制图纸,注塑模具,选择高透光率聚苯乙烯(PS)加工芯片上板,PS均匀掺杂钛白粉后加工芯片下板;捕获抗体(PCT1#)标记荧光微球后固定在微球区,检测抗体(PCT2#)和质控抗体(羊抗鼠lgG)分别包被在检测区(T区)和质控区(C区);超声键合后在荧光定量分析仪上用标准芯片绘制标准曲线,测试血清样本. 结果 可实现芯片批量加工,荧光微球粒径为1.75 μm,激发和发射波长为Ex/Em:640/660 nm,标记抗体后有0.497 μm的抗体层,C区和T区抗体牢固包被,200μl血清样本在芯片中总流动时间为10 min,其中反应7 min,洗涤3 min,C区质控均匀,T区有明显的浓度梯度相关性荧光强度变化. 结论 基于免疫荧光技术的微流控芯片可实现PCT的高灵敏度定量检测,具有重要的临床意义和指导价值.

作者:李亚楠;张辉

来源:山西医科大学学报 2018 年 49卷 9期

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作者:
李亚楠;张辉
来源:
山西医科大学学报 2018 年 49卷 9期
标签:
降钙素原 微流控芯片 免疫荧光 高灵敏度 定量检测
目的 制备一种基于免疫荧光技术的微流控芯片,用于降钙素原(PCT)的高灵敏度定量检测,评价其临床应用价值.方法 按照检测需求绘制图纸,注塑模具,选择高透光率聚苯乙烯(PS)加工芯片上板,PS均匀掺杂钛白粉后加工芯片下板;捕获抗体(PCT1#)标记荧光微球后固定在微球区,检测抗体(PCT2#)和质控抗体(羊抗鼠lgG)分别包被在检测区(T区)和质控区(C区);超声键合后在荧光定量分析仪上用标准芯片绘制标准曲线,测试血清样本. 结果 可实现芯片批量加工,荧光微球粒径为1.75 μm,激发和发射波长为Ex/Em:640/660 nm,标记抗体后有0.497 μm的抗体层,C区和T区抗体牢固包被,200μl血清样本在芯片中总流动时间为10 min,其中反应7 min,洗涤3 min,C区质控均匀,T区有明显的浓度梯度相关性荧光强度变化. 结论 基于免疫荧光技术的微流控芯片可实现PCT的高灵敏度定量检测,具有重要的临床意义和指导价值.