目的 探讨促癌基因lncRNA DANCR在尼古丁诱导的肿瘤微环境下对非小细胞肺癌(NSCLC)细胞增殖和迁移的作用. 方法 分别使用不同浓度尼古丁(0,50,250,500 ng/ml)刺激NSCLC细胞系A549,采用ELISA法检测四组细胞炎症因子TNF-α、IL-6、IL-8的水平变化.选择500 ng/ml尼古丁刺激A549细胞,RT-qPCR法检测两组细胞(0 ng/ml组、500 ng/ml组)IKKβ水平变化,Western blot法检测该两组细胞p-IκBα及胞核p65-NF-κB水平变化.A549细胞中的lncRNA DANCR以siRNA法进行沉默.以尼古丁(0 ng/ml、500 ng/ml)及DANCR沉默(未处理、si-NC转染、si-DANCR转染)联合处理细胞,分为0 ng/ml组、0 ng/ml+ si-RNA组、0 ng/ml+si-DANCR组、500 ng/ml组、500 ng/ml+ si-NC组和500 ng/ml+ si-DANCR组,使用ELISA法复测TNF-α、IL-6、IL-8的水平变化,Western blot法复测胞核p65-NF-κB水平变化,MTI法检测各组A549细胞的增殖活性变化,细胞划痕实验评估各组A549细胞的迁移能力变化. 结果 尼古丁能够以剂量依赖性方式(50,250,500 ng/ml)诱导A549细胞炎性因子TNF-α、IL-6、IL-8的水平增加(P<0.05).此外,与0 ng/ml尼古丁组相比,A549细胞炎性因子TNF-α、IL-6、IL-8水平,NF-κB炎性反应信号通路相关分子IKKβ、p-IκBα、p65-NF-κB水平,细胞增殖活
作者:兰飞;赵鹏;刘冬
来源:山西医科大学学报 2019 年 50卷 11期