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目的 建立TaqMan探针荧光定量PCR检测方法,用于临床标本中尖孢镰刀菌的快速诊断.方法针对尖孢镰刀菌的β-tubulin 基因,设计特异性引物和探针并构建该基因的重组质粒标准品;优化PCR反应条件,建立尖孢镰刀菌的荧光定量PCR检测方法;通过10种标准菌株和33株临床分离株的应用检测,验证该方法的可行性.结果 该检测方法具有较好的特异度、敏感度和重复性,6株尖孢镰刀菌均有明显扩增,而其它37株临床常见的致角膜炎真菌标准株或分离株无明显扩增;最低检出限为408 copies/μl,且变异系数低于5

作者:汲珊珊;李君文;安娜;谌志强;陈照立;邱志刚;刘先宁;王新为;郭长江;金敏

来源:现代检验医学杂志 2012 年 27卷 6期

知识库介绍

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作者:
汲珊珊;李君文;安娜;谌志强;陈照立;邱志刚;刘先宁;王新为;郭长江;金敏
来源:
现代检验医学杂志 2012 年 27卷 6期
标签:
TaqMan探针 荧光定量PCR 尖孢镰刀菌 真菌性角膜炎
目的 建立TaqMan探针荧光定量PCR检测方法,用于临床标本中尖孢镰刀菌的快速诊断.方法针对尖孢镰刀菌的β-tubulin 基因,设计特异性引物和探针并构建该基因的重组质粒标准品;优化PCR反应条件,建立尖孢镰刀菌的荧光定量PCR检测方法;通过10种标准菌株和33株临床分离株的应用检测,验证该方法的可行性.结果 该检测方法具有较好的特异度、敏感度和重复性,6株尖孢镰刀菌均有明显扩增,而其它37株临床常见的致角膜炎真菌标准株或分离株无明显扩增;最低检出限为408 copies/μl,且变异系数低于5