目的建立一种快速准确诊断禽流感病毒 H7N9型的实时荧光定量 RT-PCR检测方法。方法参照国家生物技术信息中心（NCBI）公布的 H7N9基因 HA序列，设计特异性引物及TaqMan探针；构建阳性重组质粒，验证其最低检测拷贝数、重复性及特异度。结果试验构建的阳性重组质粒，线性关系在6×102 copies／μl～6×108 copies／μl范围内检测结果良好；用该方法测得最低拷贝数为600 copies／μl，特异度和重复性（CV＜1％）良好，无交叉反应；用该荧光定量 RT-PCR检测方法检测8份阳性样品和8份阴性样品，准确率为100％（16／16）。结论实验建立的实时荧光定量 RT-PCR检测方法可用于禽流感病毒 H7N9型的快速检测。
作者：陈勉乔；于浩洋
来源：现代检验医学杂志 2016 年 31卷 3期
