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目的探索高原地区流感病毒在犬肾细胞(MDCK)上的最佳培养条件,提高流感病毒的分离效果。方法将原始标本分别接种于 MDCK细胞,通过比较CO2百分浓度(5%,4.8%,4.6%,4.4%,4.2%),TPCK-胰酶浓度(1,2,3,4,5,6,8,10μg/ml),接种量(100,200,300,400,500μl),培养时间(48,72,96,120,144 h),接种方法(吸附接种,直接接种),培养容器(细胞瓶,6孔板)对流感病毒的影响,确定最佳培养条件,对分离的各型病毒用红细胞凝集(HA)检测病毒滴度。结果通过病毒血凝素滴度结果比较,4.4% CO2与4.6% CO2,2μg/ml TPCK-胰酶,300μl与400μl的接种量、吸附接种、72 h~96 h的培养时间、6孔板收获的病毒血凝素滴度高。结论在高原地区实验室建立了 MDCK细胞培养流感病毒的最优条件。

作者:胡澜怀;周霞

来源:现代检验医学杂志 2016 年 31卷 3期

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作者:
胡澜怀;周霞
来源:
现代检验医学杂志 2016 年 31卷 3期
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流感病毒 犬肾细胞 培养条件 infulenza MDCK cells culture condition
目的探索高原地区流感病毒在犬肾细胞(MDCK)上的最佳培养条件,提高流感病毒的分离效果。方法将原始标本分别接种于 MDCK细胞,通过比较CO2百分浓度(5%,4.8%,4.6%,4.4%,4.2%),TPCK-胰酶浓度(1,2,3,4,5,6,8,10μg/ml),接种量(100,200,300,400,500μl),培养时间(48,72,96,120,144 h),接种方法(吸附接种,直接接种),培养容器(细胞瓶,6孔板)对流感病毒的影响,确定最佳培养条件,对分离的各型病毒用红细胞凝集(HA)检测病毒滴度。结果通过病毒血凝素滴度结果比较,4.4% CO2与4.6% CO2,2μg/ml TPCK-胰酶,300μl与400μl的接种量、吸附接种、72 h~96 h的培养时间、6孔板收获的病毒血凝素滴度高。结论在高原地区实验室建立了 MDCK细胞培养流感病毒的最优条件。