目的 建立一种人细胞周期蛋白依赖性激酶14(CDK14)基因表达荧光定量PCR检测方法.方法 利用Trizol法提取不同人肺癌细胞株中总RNA,以β-Actin和CDK14分别为内参和目的基因,分别设计特异性扩增引物,建立人CDK14基因表达荧光定量PCR检测系统并评估其检测性能.同时将其应用于不同细胞系siRNA干扰前后的CDK14基因相对表达水平检测.结果 经电泳分析、熔解曲线、产物测序确认人CDK14基因表达荧光定量PCR检测系统已建立,其特异性良好,重复性佳(CV=7.13％),线性范围较宽(CDK14与β-Actin分别在Ct值范围22.47～32.96与15.14～27.55间具有良好的相关性,r2=0.9844.).利用该体系检测发现:在HCC827 D5和H1650细胞中CDK14基因高表达;在1～3号干扰片段中,1号片段为有效片段.结论 人CDK14基因表达荧光定量PCR检测方法已成功建立.
作者：罗凯；黎谢梦丹；石兴源；贾晓婷；王倩；邓敏；仇秦威；张志杰；贺智敏
来源：现代检验医学杂志 2017 年 32卷 2期
