目的 检测微小核糖核酸(micro RNA,miR)-21在人正常骨细胞hFOB1.19与人骨肉瘤细胞系U2OS,Saos-2和MG-63中的表达,并探讨miR-21对骨肉瘤细胞增殖、侵袭和凋亡的影响.方法 实时荧光定量PCR法(real-time fluorescent quantitative PCR,qRT-PCR)检测人正常骨细胞hFOB1.19与人骨肉瘤细胞系U2OS,Saos-2和MG-63中miR-21的表达.选择MG-63细胞随机分为3组,利用脂质体2000分别转染空白对照(control)、阴性对照miR-21-NC及抑制剂组(miR-21-inhibitor),再通过qRT-PCR法验证转染后MG-63细胞中miR-21表达.CCK-8法检测MG-63细胞增殖能力变化;流式细胞技术检测抑制miR-21表达对MG-63细胞凋亡的影响;Transwell实验检测对MG-63细胞侵袭能力的影响以及采用Western blot检测抑制miR-21表达对MG-63细胞中PTEN,PI3K,AKT及p-AKT蛋白表达的影响.结果 人骨肉瘤细胞系Saos-2,U2OS和MG-63中miR-21相对表达水平分别为1.29±0.14,1.75±0.21和2.12±0.25,较人正常骨细胞hFOB 1.19中miR-21表达水平(0.75±0.12)显著升高,差异具有统计学意义(F=38.037,P=0.002).转染抑制剂培养48h后,与Control组miR-21表达水平(2.07±0.28)和miR-21-NC组miR-21表达水平(2.02±0.33)相比,miR-21-inhibitor组miR-21表达水平(1.07±0.15)显著下降,差异具有统
作者:姜富祥;阿尔宾;高飞;王兴
来源:现代检验医学杂志 2022 年 37卷 4期