目的:探讨小白菊内酯(PTL)对骨肉瘤细胞凋亡及凋亡相关蛋白的影响及作用机制.方法:CCK-8实验检测并筛选出PTL抑制骨肉瘤细胞活性的有效作用浓度,再通过流式细胞法检测PTL促进骨肉瘤细胞发生凋亡的有效作用浓度,最终确定出用于后续实验的有效PTL浓度,实时荧光定量PCR法和Western blot法从分子水平检测PTL对骨肉瘤细胞凋亡及相关凋亡蛋白表达的影响.结果:CCK-8实验结果表明,PTL浓度为5、10μmol/L时,对骨肉瘤细胞活力和凋亡均无显著影响.而PTL浓度为20、40μmol/L时,显著抑制骨肉瘤细胞活性(均P<0.05),PTL浓度为20、40μmol/L时,显著促进骨肉瘤细胞发生凋亡,且20、40μmol/L PTL两组间比较差异无统计学意义(均P>0.05).故选择20μmol/L PTL用于后续实验,细胞爬片及TUNEL实验证实PTL(20μmol/L)显著促进骨肉瘤细胞凋亡(P<0.05),实时荧光定量PCR法和Western blot法表明PTL显著促进骨肉瘤细胞Bax mRNA和蛋白表达上调,Cleaved-Caspase 3/Caspase 3比值上调,并抑制Bcl-2 mRNA和蛋白表达(均P<0.05).结论:PTL通过上调Bax表达及Cleaved-Caspase 3/Caspase 3比值,并抑制Bcl-2表达,进而体外诱导骨肉瘤细胞发生凋亡.
作者:纪涛;任建政;李正华;陈小龙
来源:陕西医学杂志 2022 年 51卷 2期