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目的 研究转化生长因子(TGF)-β2对人视网膜色素上皮细胞间质转化的影响.方法 体外培养的ARPE-19细胞,经不同浓度的TGF-β2(0、1、5、10 ng/mL)处理24 h后,免疫荧光染色观察细胞形态学改变;Transwell小室观察细胞迁移能力的变化;实时荧光定量聚合酶链反应(RT-PCR)及蛋白质印迹法(Western blot-ting)方法检测上皮细胞标记物E-cad及间质细胞标记物α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、纤维连接蛋白(FN)及Ⅰ型胶原蛋白(Col-Ⅰ)的基因及蛋白表达量.结果 随着TGF-β2浓度的增加,鬼笔环肽免疫荧光染色发现细胞的丝状伪足增多,并且细胞内的应力纤维也变得粗壮而且排列有序;Transwell小室结果显示:跨膜细胞数随TGF-β2浓度增加而逐渐增加,组间差异有统计学意义(F=37.45,P<0.05);E-cad mRNA和蛋白的表达随TGF-β2的浓度增加逐渐下降,组间差异有统计学意义(P均<0.05);α-SMA、FN及Col-Ⅰ的mRNA和蛋白的表达随TGF-β2浓度的增加而逐渐增高,组间差异均有统计学意义(P<0.05).结论 TGF-β2可能通过促进RPE细胞发生EMT,导致Ⅰ型胶原蛋白和纤维连接蛋白等细胞外基质大量沉积,从而在增生性玻璃体视网膜病变(PVR)的发病过程中发挥重要作用.

作者:李冬平;原莉莉;张东昌

来源:山西医药杂志 2017 年 46卷 17期

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作者:
李冬平;原莉莉;张东昌
来源:
山西医药杂志 2017 年 46卷 17期
标签:
上皮-间质转化 玻璃体视网膜病,增生性 视网膜色素上皮细胞 Epithelial-mesenchymal transition Vitreoretinopathy,proliferation Retinal pigment epi-thelial cell
目的 研究转化生长因子(TGF)-β2对人视网膜色素上皮细胞间质转化的影响.方法 体外培养的ARPE-19细胞,经不同浓度的TGF-β2(0、1、5、10 ng/mL)处理24 h后,免疫荧光染色观察细胞形态学改变;Transwell小室观察细胞迁移能力的变化;实时荧光定量聚合酶链反应(RT-PCR)及蛋白质印迹法(Western blot-ting)方法检测上皮细胞标记物E-cad及间质细胞标记物α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、纤维连接蛋白(FN)及Ⅰ型胶原蛋白(Col-Ⅰ)的基因及蛋白表达量.结果 随着TGF-β2浓度的增加,鬼笔环肽免疫荧光染色发现细胞的丝状伪足增多,并且细胞内的应力纤维也变得粗壮而且排列有序;Transwell小室结果显示:跨膜细胞数随TGF-β2浓度增加而逐渐增加,组间差异有统计学意义(F=37.45,P<0.05);E-cad mRNA和蛋白的表达随TGF-β2的浓度增加逐渐下降,组间差异有统计学意义(P均<0.05);α-SMA、FN及Col-Ⅰ的mRNA和蛋白的表达随TGF-β2浓度的增加而逐渐增高,组间差异均有统计学意义(P<0.05).结论 TGF-β2可能通过促进RPE细胞发生EMT,导致Ⅰ型胶原蛋白和纤维连接蛋白等细胞外基质大量沉积,从而在增生性玻璃体视网膜病变(PVR)的发病过程中发挥重要作用.