目的:找出调控胃癌细胞c-MET的miRNA,研究该miRNA能否通过c-MET抑制胃癌细胞的生长、增殖及侵袭转移。方法:预测软件筛选出可能调节胃癌c-MET的miRNA。荧光定量PCR检测胃癌细胞株(N87、MKN45、AGS)及正常胃黏膜细胞(GES1)中该miRNA的表达水平。过表达miRNA后检测胃癌细胞株AGS中c-MET的表达水平,选择对c-MET抑制最强的miRNA行双荧光素酶实验。平板克隆及Tran-swell实验检测过表达该miRNA后胃癌细胞的生长、增殖及侵袭转移能力,过表达c-MET后再次检测胃癌细胞的生长、增殖及侵袭转移能力。结果:预测软件显示miR-34a、miR-27b及miR-31可能调节胃癌c-MET表达。miR-34a、miR-27b及miR-31在胃癌细胞株中表达较正常胃黏膜明显降低( p<0.05)。West-ern bolt显示miR-27b对c-MET的抑制能力最强。双荧光素酶实验同样证实了c-MET是miR-27b的直接作用靶点。平板克隆及Transwell实验显示过表达miR-27b能抑制胃癌细胞的生长、增殖及侵袭转移能力,而过表达c-MET后能恢复胃癌细胞的生长、增殖及侵袭转移能力。结论:miR-27b能作用于c-MET 3′UTR端从而抑制c-MET的表达,并能通过c-MET抑制胃癌细胞的生长、增殖及侵袭转移。
作者:李丹波;徐细明
来源:现代肿瘤医学 2015 年 1期