目的:沉默肺癌细胞系A549的程序性死亡配体l(programmed death ligand 1,PD-L1)基因,观察其对A549细胞增殖和凋亡的影响.方法:构建PD-L1 shRNA重组质粒pGPU6/PD-L1,并应用脂质体转染法将其转染入A549细胞.RT-PCR法检测PD-L1基因的表达;Western blotting法检测PD-L1蛋白的表达;MTT法检测pGPU6/PD-L1对A549细胞增殖的影响;Annexin Ⅴ-FITC/PI双染法检测pGPU6/PD-L1对A549细胞凋亡的影响.结果:成功将pGPU6/PD-L1转染入A549细胞;RT-PCR结果显示pGPU6/PD-L1使A549细胞PD-L1基因表达水平降低;Western blotting结果显示pGPU6/PD-L1转染A549细胞使PD-L1蛋白表达减少;MTT结果显示pGPU6/PD-L1能够抑制A549细胞增殖;Annexin Ⅴ-FITC/PI双染法检测结果显示pGPU6/PD-L1能够诱导A549细胞凋亡.结论:pGPU6/PD-L1能够下调肺癌细胞A549 PD-L1的表达,抑制细胞增殖,并诱导细胞凋亡.
作者：蒋涛；付立业；李妍
来源：现代肿瘤医学 2015 年 23卷 2期
