目的：采用重组慢病毒系统，通过过表达和 RNA 干涉的方法分别增加和降低 NDRG2（N - Myc down-stream regulated gene 2）基因后，检测人结肠癌细胞系 DLD -1中丙酮酸脱氢酶（PDH）的表达水平及氧消耗率（OCR）。方法：分别采用表达 NDRG2慢病毒载体 pLenti6- NDRG2和 NDRG2 shRNA 慢病毒载体 pLKO.1-shNDRG2制备病毒载体并感染 DLD -1细胞，经两周耐药筛选，获得稳定感染的细胞株。采用 Real - time PCR 和 Western blot 的方法明确 NDRG2在稳定感染细胞株中的表达情况，再使用上述方法检测稳定感染细胞株中 PDH 的表达水平，最后，通过 Seahorse 能量呼吸代谢仪，检测稳定感染细胞株中的 OCR。结果：Real -time PCR 和 Western blot 结果表明，在慢病毒 pLenti6- NDRG2稳定感染的 DLD -1细胞中，NDRG2表达上调，PDH 表达上调；pLKO.1- shNDRG2稳定感染的 DLD -1细胞中，NDRG2的表达下调，PDH 表达下调。Seahorse 结果表明，NDRG2过表达细胞株中细胞的 OCR 上升，而 NDRG2 RNA 干涉细胞株中细胞的 OCR 明显下降。结论：通过过表达和抑制 NDRG2基因，证实了 NDRG2作为抑癌候选基因能够有效促进结肠癌细胞系 DLD -1中丙酮酸脱氢酶 PDH 的表达，并促进有氧氧化。
作者：徐欣元；雷世雄；沈岚
来源：现代肿瘤医学 2015 年 5期
