目的:观察Akt1干扰后胆管癌HUCCA-1细胞增殖、细胞周期及凋亡变化,及其与下游蛋白的相关性.方法:构建干扰质粒siAkt1转染胆管癌HUCCA-1细胞,Western印迹法及qRT-PCR法检测转染效率及Akt1下调后凋亡相关基因表达.MTT法检测细胞增殖,PI法检测细胞周期,流式细胞术检测细胞凋亡.结果:MTT显示,与MOCK组和siRNA control组对比,siAkt1转染后HUCCA-1细胞增殖能力减弱,在72h及96h差异均具有显著性(P＜0.05);转染siAkt1细胞停留在G1期比例增高,G2及S期比例减少(P＜0.05);转染后早期凋亡及晚期凋亡率均升高(P ＜0.05;P ＜0.01).在siAkt1转染后,凋亡相关基因p85mRNA及p-Akt1(磷酸化的Akt1)mRNA表达水平降低(P＜0.05),Cleaved Caspase-9 mRNA及Cleaved Caspase-8mRNA表达升高(P＜0.05).凋亡相关基因p85及p-Akt1蛋白表达降低(P＜0.05),Cleaved Caspase-9及Cleaved Caspase-8蛋白表达水平升高(p＜0.05).结论:对胆管癌HUCCA-1细胞中Akt1表达进行下调导致细胞增殖能力下降,促进细胞进入G1期,凋亡率升高,机制与其下游Cleaved Caspase基因表达具有相关性.
作者：梁义；张小薄；姚旭；李跃；李殿
来源：现代肿瘤医学 2016 年 24卷 3期
