目的:探讨 Dab2启动子区的甲基化状态及其对 Dab2表达的影响,对 Wnt 通路和肺癌细胞增殖能力的影响。方法:BSP 检测去甲基化试剂处理前后 BE1细胞启动子区 Dab2甲基化状态;Real -time PCR 检测去甲基化试剂处理前后 Dab2 mRNA 水平;Western blot 检测去甲基化试剂处理前后 Dab2变化和 Wnt 通路的变化;MTT 法检测 BE1细胞经去甲基化试剂处理后增殖能力的变化。结果:BE1细胞 Dab2基因启动子区处于高甲基化状态,经去甲基化试剂处理后 Dab2启动子区发生明显去甲基化(37% vs 10.3%,P <0.01),Dab2 mRNA 在去甲基化试剂处理后明显上调,Western blot 检测显示 BE1细胞经去甲基化试剂处理后 Dab2蛋白表达明显上调,而 Wnt 通路关键分子β-catenin 及其下游 Cyclin D1表达下调,BE1细胞经去甲基化试剂处理后增殖能力明显下调。结论:Dab2基因启动子区高甲基化抑制肺癌细胞中 Dab2转录水平和表达,Dab2基因去甲基化抑制 Wnt 通路,进而抑制肺癌细胞的增殖能力。
作者:杨连赫;马爽;张婉琳;沈帅;于承仟;王雪
来源:现代肿瘤医学 2016 年 24卷 23期