目的:研究上调Smac/DIABLO基因在人子宫内膜癌Ishikawa细胞中的表达,对紫杉醇化疗增敏方面的作用及可能机制.方法:构建Smac/DIABLO的过表达质粒pcDNA3.1-Smac,应用脂质体法转染人子宫内膜癌Ishikawa细胞,实验分为过表达组、空载体对照组和空白对照组.转染48 h后,应用qRT-PCR和Western blot法检测Smac/DIABLO mRNA及蛋白表达情况.将转染pcDNA3.1-Smac的Ishikawa细胞暴露于终浓度为0.1 μmol/L紫杉醇中,实验分为pcDNA3.1-Smac+紫杉醇组、紫杉醇组和空白对照组,CCK-8法检测暴露紫杉醇24,48,72,96 h,3组细胞增殖能力的变化.应用Western blot检测Ishikawa细胞过表达Smac/DIABLO并暴露于紫杉醇后,Caspase-3,Caspase-7,Caspase-9蛋白的表达情况.结果:转染48 h后,过表达组较空载体对照组、空白对照组,Smac/DIABLO mRNA及蛋白相对表达量均明显增加(F=152.056,P=0.002;F=697.953,P=0.001).CCK-8实验结果显示,过表达Smac/DIABLO并暴露于紫杉醇后,pcD-NA3.1-Smac+紫杉醇组较紫杉醇组和空白对照组,细胞增殖能力受到抑制(P＜0.05).Western blot检测到pcDNA3.1-Smac+紫杉醇组Caspase-3,Caspase-7,Caspase-9蛋白的相对表达量比较另外两组明显增加(Fcaspase-3=434.277,Fcaspase-7=392.401,Fcaspase-9=88.936,P＜0.05).结论

作者：王晓华；韩冰；张玉娟

来源：现代肿瘤医学 2019 年 27卷 18期