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目的:探究miR-135b-5p通过靶向CMTM3基因调节胃癌细胞的增殖、侵袭和迁移能力.方法:采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测胃癌组织和细胞系中CMTM3和miR-135b-5p的表达水平.利用慢性病毒转染技术将miR-135b-5p inhibitor转染至胃癌细胞,RT-qPCR检测转染效率;CCK-8比色法和Transwell实验检测转染后细胞的增殖、侵袭和迁移能力;Western blotting检测转染后细胞中CMTM3蛋白表达水平.利用生物信息学网站预测miR-135b-5p潜在靶基因CMTM3,利用荧光素酶实验进行验证.结果:RT-qPCR检测结果表明,miR-135b-5p在胃癌组织和胃癌细胞株中呈现高表达,CMTM3在胃癌组织中呈现低表达(P<0.01).RT-qPCR检测转染效率,结果显示,转染miR-135b-5p inhibitor敲低了miR-135b-5p的表达水平(P<0.001);CCK-8和Transwell实验结果表明,敲低miR-135b-5p后抑制了胃癌细胞的增殖、侵袭和迁移能力(P<0.01),Western blotting实验结果表明,敲低miR-135b-5p促进了CMTM3蛋白的表达.生物信息学网站预测CMTM3为miR-135b-5p的潜在靶基因,荧光素酶实验证实了miR-135b-5p直接靶向胃癌细胞中CMTM3基因(P<0.01).结论:miR-135b-5p作为重要的调节因子,反向调节抑癌靶基因CMTM3,从而促进胃癌细胞的增殖、侵袭和迁移能力.

作者:李永红;刘文明;李伟;董链;杨峥嵘;衷敬华

来源:现代肿瘤医学 2020 年 28卷 19期

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作者:
李永红;刘文明;李伟;董链;杨峥嵘;衷敬华
来源:
现代肿瘤医学 2020 年 28卷 19期
标签:
miR-135b-5p 胃癌 CMTM3
目的:探究miR-135b-5p通过靶向CMTM3基因调节胃癌细胞的增殖、侵袭和迁移能力.方法:采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测胃癌组织和细胞系中CMTM3和miR-135b-5p的表达水平.利用慢性病毒转染技术将miR-135b-5p inhibitor转染至胃癌细胞,RT-qPCR检测转染效率;CCK-8比色法和Transwell实验检测转染后细胞的增殖、侵袭和迁移能力;Western blotting检测转染后细胞中CMTM3蛋白表达水平.利用生物信息学网站预测miR-135b-5p潜在靶基因CMTM3,利用荧光素酶实验进行验证.结果:RT-qPCR检测结果表明,miR-135b-5p在胃癌组织和胃癌细胞株中呈现高表达,CMTM3在胃癌组织中呈现低表达(P<0.01).RT-qPCR检测转染效率,结果显示,转染miR-135b-5p inhibitor敲低了miR-135b-5p的表达水平(P<0.001);CCK-8和Transwell实验结果表明,敲低miR-135b-5p后抑制了胃癌细胞的增殖、侵袭和迁移能力(P<0.01),Western blotting实验结果表明,敲低miR-135b-5p促进了CMTM3蛋白的表达.生物信息学网站预测CMTM3为miR-135b-5p的潜在靶基因,荧光素酶实验证实了miR-135b-5p直接靶向胃癌细胞中CMTM3基因(P<0.01).结论:miR-135b-5p作为重要的调节因子,反向调节抑癌靶基因CMTM3,从而促进胃癌细胞的增殖、侵袭和迁移能力.