目的:探讨微小RNA-223-3p(miR-223-3p)对转化生长因子Ⅲ型受体(TGFBR3)的靶向调控及对肺癌上皮间质转化(EMT)及Wnt/β-catenin通路相关指标的影响.方法:采用实时荧光定量PCR(qPCR)检测肺癌细胞(95D、LTEP-α-2、A549及NCI-H460)以及人肺上皮细胞BEAS-2B的miR-223-3p和TGFBR3水平,经双荧光素酶报告基因实验验证miR-223-3p和TGFBR3的靶向关系.将A549细胞分成3组:对照组、miR-223-3p NC 组(转染 miR-223-3p NC)、miR-223-3p mimic 组(转染 miR-223-3p mimic),MTT法、划痕实验及Transwell小室实验分别检测3组细胞的增殖及迁移能力.接着收集3组转染后的细胞,分别制备裸鼠移植瘤,处死裸鼠并剥离肿瘤组织,测量肿瘤体积及重量,免疫组化法对比各组镜下TGFBR3蛋白的表达情况,Western blotting实验检测EMT相关指标上皮钙黏蛋白(E-Cadherin)、神经型钙黏蛋白(N-Cadherin)、波形蛋白(Vimentin)及Wnt/β-catenin通路相关因子(Wnt1和β-catenin)的表达.结果:与BEAS-2B细胞对比,肺癌细胞miR-223-3p及TGFBR3的表达水平均降低,差异有统计学意义(P<0.05);miR-223-3p能靶向调控TGFBR3的表达.miR-223-3p mimic组A549细胞的增殖活力、划痕愈合率及穿膜细胞数均较miR-223-3p NC组明显降低(P<0.05);此外,miR-223-3p mimic组裸鼠
作者:姚菲;石玮;李春姗;蒋锐沅;林丽珠
来源:现代肿瘤医学 2022 年 30卷 15期