目的探讨重组的人胰岛素样生长因子I型受体(IGF-IR)的反义基因,对乳腺癌细胞内源性IGF-IR表达的抑制作用.方法体外构建人IGF-IR的反义基因真核表达载体pIGF-IR/As,并转染人MCF-7乳腺癌细胞,经G418筛选而获得稳定表达外源性反义基因的新细胞株MCF-7/As,在基因水平和蛋白质水平检测内源性IGF-IR的表达情况.结果人IGF-IR的反义基因真核表达载体pIGF-IR/As构建成功.RT-PCR显示MCF-7转染前后IGF-IRmRNA的表达水平分别为(0.71±0.04)和(0.43±0.06),表达明显下降(P<0.05);Western blot显示其蛋白质的表达水平呈相同的变化趋势(P<0.01).结论本实验构建的载体pIGF-IR/As能够稳定转染MCF-7细胞,所表达的IGF-IR的反义基因能够在基因和蛋白质水平显著抑制内源性IGF-IR的表达.
作者:张慧峰;林从尧
来源:实用癌症杂志 2004 年 19卷 6期