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目的 探讨共表达人CD40L和IL-2的5/F35嵌合型腺病毒载体(Ad5/F35 CD40L-IL-2),对人单核细胞来源的树突状细胞(Mo-DC)的感染效率及感染后对Mo-DC表型及IL-12产生的影响.方法 提取人外周血单个核细胞(PBMCs)总RNA,应用RT-PCR方法克隆CD40L和IL-2,构建Ad5/F35 CD40L-IL-2腺病毒载体.分离和培养人Mo-DC后,应用流式细胞仪分析嵌合型腺病毒载体对Mo-DC的感染效率、CD40L基因表达及感染前后Mo-DC表型的变化;采用ELISA法测定Mo-DC培养上清中细胞因子IL-2和IL-12的含量.结果 成功克隆CD40L和IL-2基因并构建成5/F35嵌合型腺病毒载体.Ad5/F35嵌合型腺病毒载体能高效感染Mo-DC,感染效率可达75

作者:张璇;张玉萍;谭晓华

来源:实用癌症杂志 2013 年 28卷 3期

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作者:
张璇;张玉萍;谭晓华
来源:
实用癌症杂志 2013 年 28卷 3期
标签:
CD40配基 白细胞介素-2 白细胞介素-12 5/F35嵌合型腺病毒载体 树突状细胞
目的 探讨共表达人CD40L和IL-2的5/F35嵌合型腺病毒载体(Ad5/F35 CD40L-IL-2),对人单核细胞来源的树突状细胞(Mo-DC)的感染效率及感染后对Mo-DC表型及IL-12产生的影响.方法 提取人外周血单个核细胞(PBMCs)总RNA,应用RT-PCR方法克隆CD40L和IL-2,构建Ad5/F35 CD40L-IL-2腺病毒载体.分离和培养人Mo-DC后,应用流式细胞仪分析嵌合型腺病毒载体对Mo-DC的感染效率、CD40L基因表达及感染前后Mo-DC表型的变化;采用ELISA法测定Mo-DC培养上清中细胞因子IL-2和IL-12的含量.结果 成功克隆CD40L和IL-2基因并构建成5/F35嵌合型腺病毒载体.Ad5/F35嵌合型腺病毒载体能高效感染Mo-DC,感染效率可达75