目的 观察转染后CD44 +肺癌干细胞内PKM2 基因的表达变化及其对CD44 +肺癌干细胞增殖、耐药性的影响. 方法 将A549肺癌细胞株继代培养后,采取免疫磁珠细胞分选法,通过AutoMACS仪器,分选出CD44 +细胞. 实验分为实验组和对照组,将人工合成的针对PKM2 基因的siRNA 片段通过Lipofectamine 2000 转染细胞,分别采用实时荧光定量聚合酶链反应( real-time quantitativePCR ,qRT-PCR)和Western blot 法检测各组细胞中PKM2的mRNA和蛋白质的表达量,细胞免疫组化染色分析CD44及PKM2表达,并采用MTT法检测各组细胞的增殖活力. 药性敏感性试验:在培养基内添加不同浓度化疗药物DDP,并通过MTT assay测试细胞的生长及增殖速度. 结果 CD44 +肺癌干细胞转染PKM2 siRNA后,CD44 +肺癌干细胞中PKM2 mRNA及蛋白表达减弱(P<0.05),细胞增殖能力减弱,抗肿瘤药物耐药性降低. 结论 PKM2对CD44 +肺癌干细胞的增殖起促进作用,同时具有增强抗肿瘤药物耐药性的作用.
作者：郭昌莹；匡裕康；李桃生
来源：实用癌症杂志 2015 年 30卷 5期
