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目的 研究3T3-L1前脂肪细胞和成熟脂肪细胞中是否有胆碱能系统物质mRNA的表达,及烟碱样乙酰胆碱受体(nAChR)α7功能状态对脂肪因子肾上腺髓质素(AM)mRNA表达的影响,初步阐明脂肪细胞中非神经胆碱能系统与肥胖、胰岛素抵抗及其他脂代谢性疾病的关系.方法 以3T3-L1前脂肪细胞和诱导分化成熟的3T3-L1脂肪细胞为研究对象,采用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测前脂肪细胞和成熟脂肪细胞中是否有乙酰胆碱酯酶(AChE)、胆碱乙酰转移酶(ChAT)和nAChRα7三种胆碱能系统主要组分的mRNA表达;对前脂肪细胞及成熟脂肪细胞分别予不同水平的广谱nAchR激动剂尼古丁、特异性nAchRα7激动剂氯化胆碱及特异性nAchRα7拮抗剂甲基牛扁亭碱处理12、24、36h,并设立相应处理时间的空白对照组,应用RT-PCR方法检测前脂肪细胞和成熟脂肪细胞中AM mRNA的表达.结果 1.RT-PCR方法证实在3T3-L1脂肪细胞和成熟脂肪细胞中均有AChE、ChAT、AChR α7的mRNA表达.2.给予不同剂量的尼占丁和氯化胆碱,干预作用不同时间,3T3-LJ前脂肪细胞和成熟脂肪细胞中AM mRNA表达水平与相应的空白对照组比较均呈剂量依赖性升高(P<0.05或P<0.01),但随干预作用时间延长,这种剂量依赖性上调效应减弱.二种激动剂以氯化胆碱的剂量依赖性上调效应更明显.而相同剂

作者:梁晓燕;胡秀芬;卢慧玲;吴静;王宏伟;杨杨

来源:实用儿科临床杂志 2008 年 23卷 19期

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梁晓燕;胡秀芬;卢慧玲;吴静;王宏伟;杨杨
来源:
实用儿科临床杂志 2008 年 23卷 19期
标签:
非神经元型胆碱能系统 烟碱样乙酰胆碱受体α7 肾上腺髓质素 3T3-L1脂肪细胞 肥胖 胰岛素抵抗
目的 研究3T3-L1前脂肪细胞和成熟脂肪细胞中是否有胆碱能系统物质mRNA的表达,及烟碱样乙酰胆碱受体(nAChR)α7功能状态对脂肪因子肾上腺髓质素(AM)mRNA表达的影响,初步阐明脂肪细胞中非神经胆碱能系统与肥胖、胰岛素抵抗及其他脂代谢性疾病的关系.方法 以3T3-L1前脂肪细胞和诱导分化成熟的3T3-L1脂肪细胞为研究对象,采用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测前脂肪细胞和成熟脂肪细胞中是否有乙酰胆碱酯酶(AChE)、胆碱乙酰转移酶(ChAT)和nAChRα7三种胆碱能系统主要组分的mRNA表达;对前脂肪细胞及成熟脂肪细胞分别予不同水平的广谱nAchR激动剂尼古丁、特异性nAchRα7激动剂氯化胆碱及特异性nAchRα7拮抗剂甲基牛扁亭碱处理12、24、36h,并设立相应处理时间的空白对照组,应用RT-PCR方法检测前脂肪细胞和成熟脂肪细胞中AM mRNA的表达.结果 1.RT-PCR方法证实在3T3-L1脂肪细胞和成熟脂肪细胞中均有AChE、ChAT、AChR α7的mRNA表达.2.给予不同剂量的尼占丁和氯化胆碱,干预作用不同时间,3T3-LJ前脂肪细胞和成熟脂肪细胞中AM mRNA表达水平与相应的空白对照组比较均呈剂量依赖性升高(P<0.05或P<0.01),但随干预作用时间延长,这种剂量依赖性上调效应减弱.二种激动剂以氯化胆碱的剂量依赖性上调效应更明显.而相同剂