目的 探讨人巨细胞病毒(HCMV) AD169株在新生乳鼠海马神经细胞体外培养物感染情况及其是否存在增殖能力.方法用人胚成纤维细胞悬液培养增殖,按病毒致细胞病变效应终点稀释法以24~48 h出现(+++)~(++++)的病毒悬液在人胚成纤维细胞上滴定半数组织细胞感染量为5×107 L-1,将病毒分别接种在SD大鼠长成单层的新生乳鼠海马48 h神经细胞培养物上,每天显微镜观察记录,采用免疫组织化学方法检测神经细胞培养物上巨细胞病毒早期蛋白,间接免疫荧光检测HCMV pp65蛋白,透射电镜方法观察和鉴定HCMV在神经细胞内的感染情况.结果接种病毒的海马神经细胞在感染后第1天即可观察到特征性细胞病变效应,随着时间的延长,细胞裂解液化消失;光镜下,免疫组织化学可见巨细胞病毒产生早期蛋白表达于受感染的培养海马神经细胞中,呈棕黄色颗粒;HCMV pp65蛋白免疫荧光检测亦为阳性,阴性对照未见任何阳性信号;透射电镜可见新生鼠大脑海马神经元胞质中有直径为80~120 nm病毒颗粒.结论HCMV AD169株能够感染乳鼠海马神经细胞,并具有一定的增殖能力.
作者:杨李;吴德;金岚;李晓燕;唐久来
来源:实用儿科临床杂志 2009 年 24卷 4期